丹红健骨胶囊薄层鉴别研究

[摘要] 目的 建立丹红健骨胶囊的薄层鉴别方法。 方法 采用TLC对制剂中的丹参、红花、骨碎补进行了鉴别。结果 薄层色谱斑点清晰，空白样品无干扰。结论 该方法简便、精确、重现性好，可用于该制剂的质量控制。

[关键词] 丹红健骨胶囊；薄层鉴别；丹参；红花；骨碎补

[中图分类号] R28 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2015）11（a）-0153-02

[Abstract] Objective To establish the TLC Standards of Danhongjiangu capsule. Methods Salvia Miltiorrhiza， drynaria rhizome，rattletop，Radix Puerariae in Danhongjiangu capsule were identified by TLC. Results The TLC spots were fairly clear and the blank test showed no interference. Conclusion The method developed is simple and accurate with good reproducibility，and the method can be used for quality control of SanBai enema

[Key words] Danhongjiangu capsule； TLC； Salvia Miltiorrhiza； Carthami Flos； Drynaria Rhizome

颈性眩晕是因椎动脉颅外段受到颈部病变的影响而使血流发生障碍引发的眩晕综合征。由于现代人们生活节奏和方式的转变，颈性眩晕患者近年呈现多发趋势，然而目前临床治疗中缺乏有效的药物，特别是中药。丹红健骨胶囊为该院临床经验方剂，该方剂是以丹参为君药，共计7味药物，具有补肾壮骨、活血通脉的作用，做为该院院内制剂临床使用多年，疗效确切。为进一步造福广大病患，该院决定对该院内制剂进行新药临床前的研究，在建立了该新药的制备工艺，并进行三批中试样品的试制实验之后，我们重点对该新药质量标准进行了制定，经过大量实验研究，建立了制剂中丹参、红花、骨碎补等药材的薄层鉴别方法，所建立的薄层鉴别方法简单、稳定、重现性好，可以很好地控制该制剂的质量。

1 仪器与试药

1.1 仪器

薄层色谱扫描仪（瑞士卡玛，CAMAG TLC SCANNER3），超声波清洗机（功率250 W，频率20 kHZ）昆山市超声波仪器有限公司，上海梅香HH-8型电热恒温水浴锅（上海平轩科学仪器有限公司），红景天牌DE-300高速万能粉碎机（长沙市卓成医疗器械有限公司），

1.2 试药

高效薄层预制板（生产厂家为青岛海洋化工厂）。丹参对照药材（120923-201113购于中国药品生物制品鉴定所）、丹酚酸B对照品（111562-201313购于中国药品生物制品鉴定所）、骨碎补对照药材（121169-201304购于中国药品生物制品鉴定所）、红花对照药材（120907-201412购于中国药品生物制品鉴定所）。丹红健骨胶囊由长春中医药大学附属医院实验研究中心提供。

2 方法与结果

2.1 鉴别

2.1.1 丹参鉴别 取本品胶囊，除去囊壳，内容物置研钵中研细，取2 g，加入20 mL甲醇置超声波清洗机中超声处理30 min，漏斗过滤，过滤后提取液水浴蒸干，用水10 mL溶解残渣，再用浓氨试液将pH值调节至11，再用乙酸乙酯振摇萃取3次，每次乙酸乙酯用量为10 mL，萃取之后，水液再用盐酸将pH值调节至2，用乙酸乙酯萃取3次，每次乙酸乙酯用量为10 mL，收集第二次乙酸乙酯萃取部分，置水浴蒸干，残渣再加甲醇1 mL溶解，得供试品溶液。依据本制剂处方比例和制剂工艺操作，得到丹参的阴性样，再按照供试样品溶液的制备方法操作得到阴性样品液。取丹酚酸B对照品，加甲醇制成2 mg/1 mL的对照品溶液。吸取供试样品溶液、阴性样品液、丹酚酸B对照品溶液各10 μL，共同点于硅胶GF254薄层板上，采用甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2∶3∶4∶0.5∶2）混合液为展开剂，上行展开，展开后，在紫外灯（254 nm）下观察，在薄层板上，供试品与对照品色谱相同位置显相同颜色的斑点，而阴性样品色谱相应位置无相应斑点与之对应[1-3]，见图1。

2.1.2 红花鉴别 取本品胶囊，除去囊壳，内容物置研钵中研细，取2 g，加入20 mL 80%丙酮超声波清洗机中超声处理30 min，漏斗过滤，过滤后即为供试品溶液。称取0.5 g红花对照药材，按供试品溶液制备方法操作，得红花药材溶液。依据本制剂处方比例和制剂工艺操作，得到红花的阴性样，再按照供试样品制备方法操作得红花阴性样品液。吸取红花供试品溶液、红花阴性样品液、红花药材溶液各5 μL，点于同一块硅胶G薄层预制板上，采用乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇（7：2：3：0.4）混合溶液为展开剂，上行展开，展开后晾干。在日光下观察，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，而阴性样品色谱相应位置无相应斑点与之对应[3-5]，见图2。

2.1.3 骨碎补鉴别 取本品胶囊，除去囊壳，内容物置研钵中研细，取2 g，用30 mL乙酸乙酯超声波清洗机中超声处理30 min，漏斗过滤，过滤后提取液水浴蒸干，蒸干的残渣用2 mL甲醇使溶解，取上清液作为供试品溶液。按制剂处方比例和制备工艺方法，制备除去骨碎补的阴性样品。再取柚皮苷对照品，加甲醇制成0.5 mg/1 mL的对照品溶液。吸取对照品溶液4 μL、供试品溶液5～10 μL、阴性样品溶液5～10 μL，点于同一块硅胶G薄层预制板上，采用甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水（1∶12∶2.5∶3）的上层溶液作为波层色谱展开剂，上行展开后晾干，喷以2%三氯化铝乙醇溶液，在紫外灯（365 nm）下进行观察。发现，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显示相同颜色的荧光斑点，而阴性样品色谱相应位置无相应斑点与之对应[6-7]，见图3。

3 讨论

由于颈性眩晕病因的不确定性和复杂性，给治疗带来了很大困难，目前对颈性眩晕的治疗包括药物、中医、理疗以及外科手术等。中药治疗颈性眩晕的特点在于中药剂型丰富，给药途径较多，联合用药治疗，中药治疗颈性眩晕临床对比研究较多，从而促使药物使用多元化，对中药干预机制及疗效评价指标的研究内容也比较多样，充分体现了中药在治疗颈性眩晕方面具备的显著优势。丹红健骨胶囊是由丹参等共计7味药物组成，具有补肾壮骨、活血通脉，做为我们医院的院内制剂临床使用多年，疗效十分显著。到目前为止，我们已经建立了丹红健骨胶囊的制备工艺研究，进行了中试生产，并以其中一批中试样品为制剂，进行了质量标准的建立工作。在建立上述薄层鉴别方法时，曾采用药典方法进行处理，但因阴性干扰较大，无法获得满意效果，改用上述鉴别方法后，薄层色谱斑点清晰，重现性好，故采用本方法作为当归的薄层鉴别方法。

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（收稿日期：2015-08-03）