试析如何利用微生物检测法实现板蓝根及其制剂的质量控制
[摘要]目的：主要对板蓝根采取微生物检测的方式剂量范围作出合理研究，并且得到相应的剂量曲线，从而根据板蓝根相关曲线图对各种制造商所生产的板蓝根片作出检验，进而达到质量要求。方法：通过采取菌敏试验的方式来对板蓝根水提取的液体中各种种类的抑菌性作出合理检验，并且建立了板蓝根鉴定法。结果：通过对板蓝根中不同的菌敏感进行检验后得知，枯草芽孢菌的抑菌圈周围不模糊，而且具有很强的敏感度。结论：通过利用微生物检测的手段对板蓝根的相应成分有效控制，能够达到良好的可行效果，从而能够采取以往的检测手法对板蓝根药材等相关制剂做出讨论。
[关键词]板蓝根；微生物检定法；生物效价
[中图分类号]TQ352.79 [文献标识码]A [文章编号]1672-5018（2016）12-146-01
板蓝根和西药性质之间存在一定的差异性，中药通常具有很多的活性成分能够达到药理的效果。目前，我国医药行业对中药的相关品质引起了重视，中药的品质主要将理化测定作为对象，也就是所说的通过对中药化学成分做出相关检验。但是，由于中药不单只是起到活性成分的效果，也不是各种活性成分聚集在一起，特别是针对复方制剂药物而言，相关人员只能对小部分成为做出合理控制，并不能对所有的品质以及临床所产生的效果做出控制。为了确保中药品质具有一定的安全性，相关人员应当在确保品质的基础上采取活性测定的形式，用来对中药的整体品质做出有效评价，确保中药可靠性。板蓝根属于我国一种中药，它有很多的优点，不但能够清热解毒，而且还能够达到消肿的效果。板蓝根有很多的成分，倘若使用指纹图谱进行控制其品质对含量有一定的缺乏性，主要治疗的症状和当前医学感染性疾病之间存在相同之处，具有杀菌等多方面的优点，所以使用抗菌活性能够体现出其价值。对此，本次试验主要依据西药有效成分的相关方式对制剂采取生物效价检定法进行了分析。
1、仪器与试药
仪器与试药多功能微生物自动测量分析仪；高效液相色谱仪，色谱工作站；色谱柱；紫外可见分光光度计；生化培养箱；单人单净化工作台；高压蒸汽灭菌器；双频脱气智能型超声混均仪；冰箱。板蓝根对照药材；板蓝根片（规格为每片0.36g）；抗生素I号培养基、抗生素Ⅱ号培养基；乙醚、乙醇、丙酮等均为分析纯。试验菌：伤寒沙门氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、福氏志贺氏菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌。上述菌种经活化后，用无菌生理盐水配制成菌液，备用。
2、方法和结果
2.1板蓝根提取液的制备
取板蓝根对照药材十克，四份，分别加入八倍量水、乙醚、乙醇、丙酮，500W超声提取三十分钟，蒸干，提取物加五十毫升蒸馏水超声提取一小时，过滤、浓缩成一毫升含一克生药的提取液，4T：密封保存备用。预实验发现，在四种提取溶剂中，乙醇的提取效果最好以板蓝根中代表成分靛玉红和腺苷为检测指标，因此，本文选择乙醇提取物进行以下实验。
2.2选择实验菌株
通过实际实验证实了板蓝根提取液对多种菌株都有很好的抑菌效果，根据相关原则及技术，采用二倍稀释法对不同标准菌株的最小抑菌浓度进行检测，平板转染法测定最小杀菌浓度；通过检测实验证实，采用福氏志贺氏菌时，“上文中提到的药液所致的抑菌圈有多层圈现象，抑菌圈不清晰，调换培养基种类，调节培养基和磷酸盐缓冲液的pH，都不能很好地消除多层圈现象。而其他四种菌株效果良好，菌层生长旺盛，抑菌圈边缘清晰，敏感度较高，可见板蓝根提取液对枯草芽胞杆菌敏感，故选择枯草芽胞杆菌为测定菌株。
2.3制备双碟
相关人员应当恰当的使用双碟，并且对其进行合理的分配，采取湿热菌后融化的形式，从而确保在双碟下面摊布保持均匀的效果，然后将其放置到相应工作台做好凝固处理，并且将其当做地底层。除此之外，相关人员采取灭菌培养方式或者是加热融化的形式放置到不超过50。的地方，紧接着加入相应的溶液，并且在所有双碟里面都放人5毫升，从而做好底层摊布的工作，当做菌层，最后将其放置到指定的地方进行冷却即可。
2.4培养条件的设定
将对照所用药材溶液制成溶液，并加入上文中制备的双碟，放人恒温培养箱中，将温度分别调至30°、35°、37°，结果显示，在30°时抑菌圈菌层较薄，35°时出现抑菌圈边缘毛边，37°时菌层生长旺盛且抑菌圈边缘清晰。培养时间十小时以内药液扩散不完全，抑菌圈过小；培养十四小时左右有明显的抑菌圈产生但仍残留部分药液，培养十八小时抑菌圈清晰，菌层生长旺盛。培养十八小时后未见抑菌圈进一步扩大，反而会滋生其他细菌，影响测量。根据以上实验结果，确定培养温度为37°，培养时间为十八小时。
2.5中心浓度的选择
采用二倍稀释法配制板蓝根提取液各种浓度的药液，取备妥的双碟27只，分为9组，每组3只。每組各碟内3只牛津杯内分别滴满板蓝根对照药材9种质量浓度的药液，在规定的培养基和培养条件下培养18h，取出，用多功能微生物自动测量分析仪测抑菌圈直径大小，取平均值，结果数据分析得出0.0625g·mL-1对照药材溶液的抑菌圈大小合适，符合实验要求，故定其为试验中心浓度，并定为1U·mL-1。
2.6生物效应标准曲线的确定
精密移取板蓝根对照药材溶液，剂量按等比级数稀释，以1：0.8为剂距，中心浓度为0.0625g·mL-1，用蒸馏水稀释成8种质量浓度的溶液。令中心浓度为1U·mL-1，则分别为0.46、0.58、0.72、0.90、1.12、1.40、1.75和2.19U·mL-1的溶液。
3、讨论
相关人员通常将药物效价测定与相关强度对比等方面做出检验的时候，一般利用生物检测法的方式进行检验，这种方式主要对含量较少等制剂而言，是采取控制品质通常应用的一种方式；相关人员在对药材进行提取选择的方式过程中，因为提取的溶剂对中药药效会产生一定的干扰，因此相关人员应当结合实际情况，利用各种各样的提取方式对液剂进行有效提取，结果表明：通过采取乙醇的方式对板蓝根溶剂提出时，效果最为理想；相关人员利用生物检定法可以根据多种制造厂家，多种药品的相关抗菌效果做出合理的判断，对抗菌活性做出合理的评价，从而能够在最大程度上体现抗菌的有效性。不但能够对药品所含的成分以及品质做出准确检查，与此同时还能够对评价药效的好坏，而且还可以采取和以往检验方式之间进行有效结合的形式来对药品的整体品质做出合理控制。
通过以上内容的整体论述，可以看出：通过采取微生物检测的方法能够很好的对板蓝根以及相关制剂做出有效的预防，并且起到预期效果，笔者根据多年经验以及实际情况，提出相关见解，希望可以和相关人员互相学习，仅供参考。
