TP—ELISA、TPPA及FQ—PCR3种方法用于梅毒螺旋体检测的研究

[摘要] 目的 探究在梅毒螺旋体检测中应用TP-ELISA（酶联免疫吸附法）、TPPA（明胶颗粒凝集法）及FQ-PCR （荧光定量PCR法）3种方法检测的价值。方法 选取2014年1月—2015年6月收治的50例一期梅毒患者的血清标本作为实验组，同时选取50例非梅毒患者血清标本作为对照组，对这2组标本均采用TP-ELISA、TPPA及FQ-PCR 3种方法进行梅毒螺旋体的检测，对比其检测结果的差异性。结果 FQ-PCR在梅毒螺旋体检测中应用，其检测的敏感度（92.00%）明显高于TTPA檢测的敏感度（66.00%）以及TP-ELISA检测的敏感度（68.00%）（P<0.05）。结论 FQ-PCR在梅毒螺旋体检测中应用，具有较高的特异性以及敏感性，应用价值较高。

[关键词] 酶联免疫吸附法；明胶颗粒凝集法；荧光定量PCR法；梅毒螺旋体

[中图分类号] R446.6 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2017）05（b）-0054-02

梅毒主要是由TP（梅毒螺旋体苍白亚种）引起的传染性疾病，患者在疾病早期以皮肤黏膜损伤为主要的临床表现，晚期则会对其中枢神经、心血管、眼部、骨骼等重要的脏器造成损伤，具有较为复杂的病程以及较强的传染性，可通过性以及母婴的方式传播[1-2]。WHO报道显示，90%以上的梅毒患者发生于发展中国家，在部分地区，梅毒已经是较为常见的性病[3]。因此，采取有效措施对梅毒患者进行疾病检测以及治疗干预来改善其预后意义重大。该文主要对梅毒螺旋体检测中应用TP-ELISA（酶联免疫吸附法）、TPPA（明胶颗粒凝集法）及FQ-PCR （荧光定量PCR法）3种方法检测的价值作分析，内容如下文。

1 资料与方法

1.1 基本资料

选取2014年1月—2015年6月收治的50例一期梅毒患者作为实验组，同时选取50例非梅毒患者作为对照组。

实验组一期梅毒患者中，男女之比为20/30，年龄在17～62岁之间，年龄均值为（29.62±2.10）岁。

对照组患者中，男女之比为25/25，年龄在18～60岁之间，年龄均值为（30.20±2.09）岁。

两组标本进行年龄、性别等基本资料对比，差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2 方法

FQ-PCR仪器为Cobas S201核酸检测系统，试剂盒为Cobas Taqsreen MPX试纸盒；TPPA检测仪器为全自动生化分析仪OLYMPUS AU400；TP-ELISA检测仪器为Freedom evoclinical 全自动加样仪。

采用无菌棉拭子采集两组的局部渗出液、分泌物以及局部淋巴结抽出液进行FQ-PCR。采用真空采血管采集静脉血5 mL作为血液样本，将其置于无菌的试管中，并进行离心处理，取血清备用。所有检测的操作均按照试剂盒的说明书严格进行操作。

1.3 观察指标

对实验组一期梅毒患者和对照组非梅毒患者经TP-ELISA、TPPA及FQ-PCR 3种方法检测的结果进行观察分析。

1.4 统计方法

研究数据录入SPSS 22.0统计学软件进行处理，计数资料用χ2检验进行分析用[n（%）]表示。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

FQ-PCR在梅毒螺旋体检测中应用，其检测的敏感度（92.00%）明显高于TTPA检测的敏感度（66.00%）以及TP-ELISA检测的敏感度（68.00%）差异有统计学意义（P<0.05）。FQ-PCR在梅毒螺旋体检测中的特异度（100.00%）与TTPA检测的特异度（98.00%）以及TP-ELISA检测的特异度（96.00%）相比，差异无统计学意义（P>0.05）。如表1。

3 讨论

梅毒是传染性疾病的一种，其主要的传播途径为性传播，梅毒已经对我国新生儿和成人的身体健康造成了严重的影响，因此，采取有效措施对梅毒进行防治意义重[4]大。目前，并不存在霉素的特异性疫苗，早期对其疾病进行发现和治疗已经是对梅毒传播进行控制的主要措施。

目前，对梅毒螺旋体进行检测的方法主要包括分离培养法、直接镜检法、血清法、PCR法、金标法等，其中直接镜检法包括镀银染色法、暗视野显微镜法、直接荧光抗体实验等，直接镜检法检测的准确率较低，且对检验人员的要求较高[5]；分离培养法在检测的过程中，需要采集家兔的睾丸部位进行接种，检测较为复杂，临床开展存在一定的局限性[6]；血清学检测主要是对梅毒螺旋体进行检测，包括VDRL（玻片试验）、USR（反应素玻片试验）、RPR（快速血浆反应素环状卡片试验）、TPPA、TRUST、FTA-ABS（荧光螺旋体抗体吸收试验）等，但是梅毒早期患者的体内并不存在梅毒抗体，因此，检测存在一定的局限性[7]。

PCR法可以对梅毒螺旋体中的核酸进行检测，在梅毒早期患者检测中应用，具有一定的优势。本文研究结果显示，FQ-PCR在梅毒螺旋体检测中应用，其检测的敏感度（92.00%）明显高于TTPA检测的敏感度（66.00%）以及TP-ELISA检测的敏感度（68.00%）（P<0.05）。但是该次研究受到引物设计的影响，应在两周后再次采集患者的血清进行检测，从而对患者的疾病进行确诊。

TPPA检测法是特异性试验的一种，主要是以梅毒螺旋体作为抗原，虽然其具有较高的特异性，但是其在梅毒早期患者诊断中应用，敏感性较低，且检测试剂的成本较高，检测的过程较为复杂，且在检测结果认读的过程中，存在一定的主观性，在大样本的检测中应用，较易因自凝现象而出现误诊的情况[8-9]。梅毒患者接受正规治疗之后，其TPPA阳性会终身保持，因而将TPPA试验作为对梅毒患者进行初诊的方法较为合理。

TP-ELISA在梅毒螺旋体检测中应用，也存在一定的假阳性情况，在检测的过程中，在一定程度上需要凭借临床医疗人员的经验来作判断[10]。

综上所述，TP-ELISA、TPPA及FQ-PCR 3种方法在梅毒螺旋体检测中应用，均具有一定的价值，其中，FQ-PCR在梅毒螺旋体检测中应用的敏感性与特异性更高，可以較好对梅毒患者的疾病早期进行发现，从而对其临床疾病治疗提供依据，改善梅毒患者的预后，应用价值较高。

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（收稿日期：2017-02-18）