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乙型肝炎病毒DNA定量检测与临床的关系

作者:洪淑丹 林佩飞 来源:东方食疗与保健

[摘要]目的:探讨乙型肝炎病毒DNA定量检测与临床的关系。方法:选取我院2014年8月至2016年8月收治的64例乙型肝炎患者的作为研究对象,所选取的患者均通过ELISA(酶联免疫吸附试验)来检测乙型肝炎的病毒血清标志物,聚合酶链式反应(PcR)来检测HBV-DNA的含量。结果:HBcAb、HBeAg、HBsAg的HBV-DNA的阳性率为96.6%,HBcAb、HBeAg、HBsAg为14.3%,HBeAg、HBsAg为100%,HBcAb、HBsAg为33.3%,HBeAb、HBcAb、HBsAb为20%,HBcAb、HBeAb为33.3%,HBsAb为12.5%。全阴的为0。结论:定量PCR可真实反映HBV感染、复制及病程变化,对乙型肝炎临床诊断及治疗均有较大的指导意义。

[关键词]乙型肝炎病毒;DNA定量检测;临床关系

[中图分类号]R373.2

[文献标识码]A

[文章编号]1672-5018(2017)01-214-01

近年来随着分子生物学技术的发展及其在临床应用方面的推广,应用实时荧光定量聚合酶链反应检测HBV病毒载量已成为目前临床诊断HBV感染的常用指标,进一步提高了检测的质量。同时采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙型肝炎病毒HBV标志(HBV-N[)简便易行,一直为许多临床科室使用。临床上有必要把此两种方法的检测结果联合起来进行分析,指导临床应用。为了探讨乙型肝炎病毒DNA的定量检测和临床的关系,选取我院2014年8月至2016年8月收治的64例乙型肝炎患者的作为研究对象,所选取的患者均通过ELISA(酶联免疫吸附试验)来检测乙型肝炎的病毒血清标志物,聚合酶链式反应(PCR)来检测HBV-DNA的含量。现将大致研究结果报告如下。

1.资料与方法

1.1一般资料选取我院2014年8月至2016年8月收治的64例乙型肝炎患者的作为研究对象,其中男36例,女28例,年龄在13~75岁之间,平均(33.9±15.1)岁,所选取的患者都符合病毒性肝炎的诊断标准。且各类型的肝炎患者之间的资料没有明显的差异,结果具有可比性。

1.2检测的仪器和试剂HBV血清检测标志物检测试剂盒和HBV核酸扩增荧光检测试剂盒;荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析仪。

1.3方法在患者晨起空腹时抽取5 m1静脉血,将血清离心分装在-20°C下保存备用。然后通过ELISA(酶联免疫吸附试验)来检测乙型肝炎的病毒血清标志物,操作步骤按照试剂盒的规定进行。临床方法采集患者的肘静脉血,采取实时荧光定量PCR方式对乙肝DNA进行检测。观察对比荧光定量PCR方式对乙肝DNA检测的准确率。阴性的标准为荧光定量PCR在1×103拷贝数ml以下;阳性的标准为荧光定量PCR在1×103拷贝数/ml以上。对比观察阴性与阳性结果的差异,并且分析影响检测结果的因素。

1.4观测的指标观测患者血清学的诊断指标和HBV-DNA的阳性率以及定量检测的结果情况;血清学的诊断分组:第一组为HBeAb、HBeAg、HBsAg,第二组为HBeAb、HBeAg、HBsAg,第三组为HBeAg、HBsAg,第四组为HBcAb、HBsAg,第五组为HBeAb、HBeAb、HBsAb,第六组为HBeAb、HBeAb,第七组为HBsAb以及全阴。

1.5统计学方法采用SPSS16.0统计学软件对数据进行统计学处理,以P<0,05为差异具有统计学意义的基础。

2.结果

64例患者血清学的诊断指标和HBV-DNA的阳性率以及定量检测的结果情况,详见表1。

3.讨论

乙型肝炎是嚴重威胁人类健康的、发病率很高的传染病,对乙肝病毒(HBV)的研究虽然取得了很大进展,但是目前仍然没有非常有效的办法,随着HBV基因型概念的提出,乙肝的研究进入了一个新的阶段。HBV的基因型存在一定的地区分布特征,并可能与疾病的进展有一定的关联。随着分子生物技术的发展,病毒感染的临床诊断技术已从定性检测发展到定量检测。从核酸杂交技术到定量PCR技术检测HBVDNA,其灵敏度和特异性不断提高,且在研究病毒感染量与临床病毒的关系、评价和检测抗病毒药物疗效等方面具有重要指导作用。我国现在属于乙型肝炎大国,发病率在全世界排在前几位。有研究表明,HBsAg的流行率大约为9.75%,当人体感染了乙型肝炎病毒之后会出现不同的症状以及临床表现。HBeAg呈阳性表示患者体内的乙型肝炎病毒在活跃的复制,表明其具有很强的传染性。HBeAb、HBeAg、HBsAg的HBV-DNA的阳性率为96.6%,HBeAg、HBsAg为100%,说明本组患者的HBeAg阳性血清指标的模式组主要为第一组和第三组,而且其HBV-DNA的阳性率以及HBV-DNA的定量都比其他各组要高,说明HBeAg有可能与HBV-DNA的含量之间存在一定的正相关性。HBeAb、HBeAg、HBsAg为14.3%,HBV-DNA的对数的平均值为(5.01±1.79),HBeAb、HBsAg为33.3%,HBV-DNA的对数的平均值为(6.19±0.51),说明当e系统的抗原阴转时,HBV-DNA还是有可能被检测到,虽然其含量比第一组和第三组低。HB0eAb、HBeAb、HBsAb为33.3%,HBV-DNA的对数的平均值为(3.66±0.51),说明HBsAb是一种保护性的抗体。

综上所述,各种类型的乙型肝炎患者都有一定程度HBV-DNA复制,HBeAg的阳性患者其HBV-DNA的水平最高,将HBV-DNA和HBeAg定量联合进行诊断,可以为早期的乙型肝炎筛查以及治疗提供可靠的依据。