廊坊市2013—2014年手足口病病毒核酸检测结果分析
[摘要] 目的 分析廊坊市2013—2014年手足口病病毒核酸型别及分布特征，为预防和控制手足口病提供科学依据。方法 对该市各级医疗机构送检的手足口病临床诊断病例标本，采用Real-time RT-PCR法进行病毒核酸检测并分型。结果 2013年4月—2014年12月共收到咽拭子标本462份，检出阳性标本318份，总阳性率68.83%，其中EV71型95份，占29.87%；CoxA16型108份，占33.96%。发病年龄主要集中在5岁以下儿童，占85.50%。结论 2013年廊坊市手足口病的病原体以EV71型为主，2014年廊坊市手足口病的病原体以CoxA16型为主，5岁以下儿童是肠道病毒感染的高危人群。
[关键词] 手足口病；核酸；肠道病毒EV71型；肠道病毒CoxA16型
[中图分类号] R51 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2015）03（c）-0018-02
手足口病（hand-foot-mouth disease，HFMD）是由肠道病毒引起的、一种儿童常见急性传染病，多发生于5岁以下儿童，该病出现发热和手、足和口腔等部位的发疹、溃疡[1]，具有播散快、流行性强的特点。引起手足口病的肠道病毒有20多种（型），其中以肠道病毒71型（EV 71）和柯萨奇病毒A16型（Cox A16）最为常见。近几年全世界已有多个国家和地区报告了手足口病的流行[2-3]，引起手足口病的肠道病毒有20多种（型），其中以EV71型和CoxA16型感染最常见。该研究对2013—2014年廊坊市手足口病临床诊断病例进行核酸检测分析。
1 资料与方法
1.1一般资料
2013年4月—2014年12月廊坊市各级医疗机构临床诊断手足口病病例。
1.2诊断标准
手足口病的诊断依据参照原卫生部《手足口病诊疗指南》（2012年版）。
1.3 标本采集
用病毒采样管采集手足口病例咽拭子标本，置-70℃保存，并于48 h内冷藏送达微生物实验室。采样管由友康基业生物科技（北京）有限公司生产。
1.4提取病毒RNA
采用Ambion公司的MagMAXTM—96Viral RNA Isolation kit配套于ThermoFisher Scientific KingFisherFlex全自动磁珠提取系统，按照试剂盒说明书和仪器操作规程来提取病毒RNA。
1.5 PCR扩增
仪器：美国ABI7500实时荧光定量PCR扩增仪。核酸检测试剂盒（PCR荧光法）：由上海之江生物科技有限公司和江苏硕世生物科技有限公司生产，反应体系按照试剂和说明书配制。
1.6结果判断
按照试剂说明书判断。
2 结果
2.1核酸检测结果
2013—2014年共收到手足口病标本462份，阳性318份，阳性率68.83%。其中，EV71型95份，占阳性标本的29.87%，CoxA16型108份，占阳性标本的33.96%。不同年份手足口病核酸检出率差异无统计学意义（χ2=0.42，P>0.05），但不同年份手足口病流行核酸型别不同（χ2=020.37，P<0.01），即2013年以EV71型流行为主，2014年以CoxA16型流行为主。（表1）。
2.2 季节分布
2013—2014年廊坊市手足口病核酸阳性数均自4月份开始上升，6月达到高峰，7月开始下降，主要集中在5～8月，符合手足口病的流行特征（图1）。
2.3 地区分布
全市10个县（市、区）每年检测均有阳性病例，2013年全市以EV71型优势流行，主要分布在三河市、香河县和安次区，2014年全市以CoxA16型优势流行，主要分布在大厂县、三河市、霸州市和香河县（图2）。
2.4人群特征
2013年和2014年廊坊市手足口病阳性病例中，男性112例，女性91例，性别比1.23：1。不同性别儿童EV71型和CoxA16型阳性率差异无统计学意义（χ2=5.90，P>0.05）。发病年龄以0岁？5岁儿童为主，占85.50%。年龄最小者仅2月，最大者16岁。职业分布以散居儿童和幼托儿童为主，占总人数96.54%（表2）。
3 讨论
手足口病是由多种肠道病毒引起的全球性传染病，最早于1957年在新西兰流行[4]，世界大部分地区都有此病流行的报道。近年来，由EV 71引起的手足口病和神经系统严重并发症日益受到人们密切关注[5]，严重患者并发神经性肺水肿或脑干脑炎[6]，迅速出现死亡，因此我们应警惕上述严重并发症的发生， 2008年5月2 日原卫生部将HFMD纳入法定丙类传染病管理。
2013年和2014年共检测手足口病临床诊断病例462份，确诊率为68.83%，EV71型和CoxA16型分别占29.87%和33.96%，所以这两年引起廊坊市手足口病的主要病原体是EV71型和CoxA16型。
手足口病有明显的季节性，春末夏初季流行，6月能达到高峰；主要以5岁以下儿童为主，占85.50%；散居儿童病例多，占71.86%；男性多于女性，比例为1.23：1，可能与男孩好动，接触频繁，接触传染机会大有关。
2013年全市以EV71型优势流行，2014年全市以CoxA16型优势流行型，29.87%的以EV71感染为主， 33.96%以CoxA16感染为主，有型别交替感染的现象。全市各县（市、区）均能检出阳性病例，但是各型肠道病毒阳性检出率有差异，可能与标本来源、标本质量有一定关心，而且标本种类单一，今后应采集所有种类标本。
EV71型肠道病毒除了引起手足口病外，部分婴儿感染后容易出现严重的神经系统并发症，如无菌性脑炎、脑膜脑炎和脑干脑炎等，少数发展为肺水肿/肺出血。虽然实验室未收到手足口病重症病例，但是我们必须对有类似症状的标本及时监测，降低重症病例的发病。
5岁以下儿童为重点防治人群，他们抵抗力差，环境卫生意识不强，我们要加强宣传教育，做好疫情监测和疫情报告工作，同时加强实验室病原学检测，更好控制疫情蔓延，为手足口病患儿争取最佳治疗时间。
[参考文献]
[1] 耿贯一.流行病学[M].2 版.北京：人民卫生出版社，1996.
[2] 李静，周红瀛，杜宝静，等.邯郸地区2009—2011年重型手足口病的临床特征和流行病学分析[J].医学动物防制，2012，4（28）：411-412.
[3] 周红娟，严飞.张家港市2010—2013年儿童手足口病病原学监测及流行特征分析[J].医学理论与实践，2014（21）：2904-2905.
[4] 蔡颖，梁润梅，刘志鹏，等.2009—2013年成都市青白江区手足口病疫情分析[J].职业卫生与病伤，2015（1）：37-40.
[5] 李昆宏，董菊花，刀保清，等.2009—2013年云南省德宏州手足口病流行病学分析[J].卫生软科学，2015（2）：112-114.
（收稿日期：2015-01-15）
