杭州市萧山区2013—2015年手足口病病原谱分析
[摘要] 目的 了解2013—2015年杭州市萧山区手足口病的病原体型别及分布特征，为进一步掌握疫情动态提供依据。方法 采用实时荧光逆转录PCR（RT-PCR）方法对辖区内232例手足口病临床诊断病例标本进行病原体检测，并结合患儿临床资料分析检测结果。结果 232份标本中共检出肠道病毒（EV）阳性结果150份，阳性率为64.66%；其中肠道病毒71（EV71）阳性结果32份，柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）阳性结果26份，分别占EV阳性标本的21.33%、17.33%；非典型肠道病毒阳性结果92份，所占比例为61.33%，已占据主导地位；5岁及其以下儿童EV感染占所有感染者的98.00%；不同性别患儿EV、EV71和CoxA16阳性率差异无统计学意义（P>0.05）；患儿的主要临床症状是发热伴随疱疹。结论 引起萧山区手足口病的病原谱出现较为明显的变化，应加强对非典型肠道病毒的监测。5岁及其以下儿童是EV感染的高危人群，需要加强对该类人群的防控力度，做到早发现、早隔离、早治疗。
[关键词] 手足口病；肠道病毒7l型；柯萨奇病毒A16型
[中图分类号] R72 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2015）10（b）-0090-03
[Abstract] Objective To understand etiological classification and distribution features of hand， foot and mouth disease （HFMD） in Xiaoshan district of Hangzhou， in order to provide the references for preventing and controlling the HFMD disease. Methods A total of 232 HFMD specimens confirmed by clinical measures were detected by using reverse transcription polymerase chain reaction （RT-PCR）， then analysis laboratory results combining with children's clinical data. Results The 150 specimens were positive to enterovirus， and the positive rate was 65.59%. Furthermore， in the above results， there were 32 cases positive to enterovirus 71 and 26 cases positive to coxsackievirus A16， and the positive rates were 21.33% and 17.33% respectively. The positive rate of atypical enterovirus was 92 cases， dominated with 61.33%. Most of the HFMD patients were below the age of 5， which accounted for 98.00% to all the infectious patients. There was no statistical significance between genders in positive rates of enterovirus， enterovirus 71 and coxsackievirus A16（P>0.05）. Fever with herpes was the main clinical symptom in HFMD patients. Conclusion The pathogenic spectrum of HFMD in Xiaoshan was obviously changed， and the monitoring of atypical enterovirus should be strengthened. The children below the age of 5 were high risk group， needed to strengthen the supervision of this class of people， to achieve early detection， early isolation， early treatment.
[Key words] Hand-foot-mouth disease； Enterovirus 71； Coxsackievirus A16
手足口病（hand， foot and mouth disease， HFMD）是由多种肠道病毒（EV）引起的，以发热和手、足、皮肤和口腔黏膜疱疹为主要症状的小儿急性传染病，是我国法定报告管理的丙类传染病，多发生于学龄前儿童。引起手足口病的病原体中，以肠道病毒71型（Enterovirus 71， EV71）和柯萨奇病毒A组16型（Coxsackievirus A16， CoxA16）最为常见，两者常相伴引起手足口病的暴发和流行[1]。2012年以来，柯萨奇病毒A组6型（Coxsackievirus A6，CoxA6）逐渐成为中国手足口病的重要病原，其曾在欧洲和东南亚等世界多地引起过暴发流行[2]。大多数患儿症状轻微，少数患儿可出现无菌性脑膜炎、脑炎、急性弛缓性麻痹、神经源性肺水肿和心肌炎等，个别重症患儿病情进展快，可导致死亡[3]。2009年卫生部进一步要求加强手足口病病原学监测。为了解杭州市萧山区手足口病的病原谱分布特征，对2013—2015年辖区内采集的232例手足口病临床诊断标本进行病原学检测分析，为进一步掌握疫情动态提供科学依据。报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
采集患者3～5 d内粪便标本、肛拭子或咽拭子标本，将标本或拭子放入装有3 mL病毒保存液的采样管中，4℃保存待检。2013—2015年共收集辖区肠道门诊手足口病临床诊断病例标本232份，诊断依据依照《手足口病诊疗指南（2010版）》执行。
1.2 主要试剂和仪器
肠道病毒通用型（EV）/肠道病毒71型（EV71）/柯萨奇病毒16型（CA16）核酸测定试剂盒，QIAGEN RNeasy Mini Kit核酸提取试剂盒，以上试剂均在有效期内使用；ABI 7500荧光定量PCR仪，Centrifuge 5415D高速离心机。
1.3 方法
病毒RNA提取按照QIAGEN RNeasy Mini Kit核酸提取试剂盒说明书进行，-40 ℃保存备用；实时荧光RT-PCR检测按照之江核酸测定试剂盒说明书进行扩增循环及实验结果的判定。
1.4 统计方法
检测结果录入Excel 2007进行整理，采用SPSS 16.0统计软件进行数据处理与统计学分析，组间比较采用χ2检验。
2 结果
2.1 手足口病病原体检测结果分析
2013—2015年采集的232例临床诊断病例标本中共检出150例EV阳性结果，总体阳性率为64.66%（150/232），不同年份间手足口病阳性检出率依次为73.68%（56/76）、60.23%（53/88）、60.29%（41/68）。其中EV71阳性结果32例，CoxA16阳性结果26例，其他非典型（即非EV71和非CoxA16）肠道病毒阳性病例92例，分别占EV阳性病例的21.33%（32/150）、17.33%（26/150）、61.33%（92/150），结果见表1。2013—2015年EV阳性检出率差异无统计学意义（P>0.05）；EV71、CoxA16与非典型肠道病毒阳性检出率差异有统计学意义（P<0.01）。从连续3年的检测情况分析，萧山区手足口病病原谱主要以非典型肠道病毒为主，EV71与CoxA16已经不占据主导地位；EV71的检出率呈下降趋势，CoxA16的检出率有高有低，非典型肠道病毒的检出率呈升高趋势。
2.2 手足口病病原体检测结果的年龄分布分析
232例手足口病临床诊断病例中，EV阳性病例的最小年龄为出生4个月，最大为14岁，将所有病例按照年龄分为8个组。5岁及其以下儿童为手足口病的高危人群，占EV阳性病例总数的98.00%（147/150），见表2。
2.3 手足口病病原体检测结果的性别比例分析
150例EV阳性结果中，男性患儿EV阳性检出率为63.33%（95/150），女性患儿EV阳性检出率为36.37%（55/150），男女比例为1.73∶1，结果显示不同性别间手足口病的EV阳性检出率差异无统计学意义（P>0.05），结果见表3。
2.4 不同临床症状患儿病原体检测结果分析
232例手足口病临床诊断病例中，多数患儿出现发热症状，其中伴随疱疹109例、伴随呕吐79例、伴随精神异常31例，其他未发热13例。由上可知，发热伴随疱疹是手足口病的主要表征。检测确诊率分别是发热伴随疱疹为76.15%（83/109）、发热伴随呕吐为65.82%（52/79）、发热伴随精神异常为38.71%（12/31）、未发热为23.08%（3/13），其中伴随疱疹的确诊率最高，结果见表4。
3讨论
萧山区2013—2015年连续3年的检测结果显示，232例手足口病临床诊断病例的阳性率为64.66%（150/232），EV71、CoxA16阳性病例分别占EV阳性病例的21.33%（32/150）、17.33%（26/150），还有61.33%（92/150）的病例由非典型（非EV71和非CoxA16）肠道病毒引起。萧山区不同年份间手足口病阳性检出率无统计学差异，但是病原谱较以往已出现较为明显的变化，优势病原体是非典型肠道病毒，检出率在49.06%～70.73%之间变动；由EV71与CoxA16感染引起手足口病比例差别不大，而且EV71的检出率呈逐年下降趋势，检出率从26.79%降至12.20%，CoxA16的检出率在7.14%～28.30%之间变动。与CoxA16相比，EV71感染易导致手足口病重症的发生，危险因素较高。当EV71成为某地区流行的优势病原体意味着该区域出现手足口病重症病例的风险增高，目前萧山区的重症风险正处于降低阶段。
通过对不同年龄、不同性别、不同症状患者的手足口病病原学检测结果分析，5岁及其以下儿童为手足口病的高危易感人群，占所有阳性病例数的98.00%（147/150）。0～3岁往往是重症病例发生的危险年龄段，更加需要加大对该类人群的监测力度，关注低龄儿童的疾病表征，做到早发现、早隔离、早治疗[4]。不同性别患者间阳性检出率无显著差异，说明手足口病普遍易感。统计发现男性患儿发病率略高于女性患儿，这可能与男性患儿较女性更加活泼好动有关。活动范围与活动强度的增大会明显增加肠道病毒的暴露机会，感染几率也随之上升。手足口病的临床诊断主要依赖临床表征，该次研究对象中多数患儿表现发热症状，其中近一半出现疱疹，说明发热伴随疱疹是手足口病的主要表征，检测确诊率也高。
4 结语
综上所述，手足口病严重影响婴幼儿和儿童健康，目前尚无免疫预防措施和特效预防治疗的药物，容易引起聚集性疫情；手足口病的病原谱复杂多变，且该病原不同型别所致的手足口病在临床上难以区别。因此，加强手足口病病原谱的综合性动态监测，密切关注病原型别的构成变化，及其可能发生的病毒变异与致病性的改变，及时准确地对疫情进行预警，对于及时、快速地治疗和控制手足口病有着至关重要的作用。
[参考文献]
[1] Yang F， Zhang T， Hu Y， et al.Survey of enterovirus infections from hand， foot， and mouth disease outbreak in China， 2009[J].Virol J，2011（8）：508.
[2] Han JF， Xu S， Zhang Y， et al. Hand， foot， and mouth disease outbreak caused by Coxsackievirus A6， China， 2013[J].J Infect，2014，69（3）：303-305.
[3] 李晶华，方小楠.肠道病毒EV71型研究进展[J].病毒学报，2011，27（3）：309-314.
[4] 吕华坤，缪梓萍，王笑笑，等.浙江省手足口病重症危险因素分析[J].疾病监测，2009，24（9）：658-660.
（收稿日期：2015-07-11）
