氢化物发生及冷蒸汽—原子吸收分光光度法测定金银花中砷和汞的含量
[摘要] 目的 建立氢化物发生及冷蒸汽-原子吸收分光光度法测定金银花饮片中砷和汞含量的检验方法。方法 样品经微波消解后，原子吸收法测定砷和汞的含量。结果 砷和汞的回收率分别为107.1%和96.8%，RSD分别为2.3%和3.1%（n=6）。结论 本方法简单、准确、重复性好，可用于现行药典中重金属及有害元素的检查。
[关键词] 金银花；氢化物发生；冷蒸汽-原子吸收分光光度法；砷；汞
[中图分类号] R927 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2016）08（b）-0104-03
[Abstract] Objective To establish the inspection method of hydride generation and cold vapor-atomic absorption spectrophotometry in measuring the contents of arsenic and mercury in honeysuckle. Methods The contents of arsenic and mercury were measured by the atomic absorption method after the microwave resolution of samples. Results The recycle rates of arsenic and mercury were respectively 107.1% and 96.8%， and RSD were respectively 2.3% and 3.1%（n=6）. Conclusion The method is easy and accurate with good repeatability， which can be used in examining the heavy metal and toxic element in the current pharmacopoeia.
[Key words] Honeysuckle； Hydride generation； Cold vapor-atomic absorption spectrophotometry； Arsenic； Mercury
金银花（Lonicera ponica Thunb）为忍冬属植物，是我国常用的传统珍贵药材，同时也是制作清凉饮料的重要原料，具有“清热解毒，凉散风热”之功效[1-2]。由于近年来金银花的用途越来越广，用量越来越大，从药用到食品、饮料和日用化工等，导致价格持续上涨，从而也诱发了金银花大量造假，为了外观更鲜艳，用工业硫磺熏蒸金银花导致金银花重金属及有害元素显著上升[3-4]。砷、汞都是蓄积性毒物，其污染可通过食物链传递、富集和放大，主要危害人的神经系统，也可对皮肤黏膜及泌尿、生殖等系统造成损害，其含量高低直接对人体形成危害。目前我国对砷和汞的检测多采用原子荧光光谱法，但利用原子荧光光谱法进行重金属及有害元素检查并未被收载于《中国药典》的各个版本中，因此本实验收集市面上零售的5批金银花饮片分别采用药典规定的氢化物法和冷蒸汽法对金银花中砷和汞进行测定，方法简单、准确、重现性好，为客观反映目前我国市场上零售的金银花饮片的质量提供参考。
1 仪器与材料
AA-7000型原子吸收分光光度计及工作站（岛津），附砷、汞空心阴极灯（北京有色金属研究总院），氢化物发生器HVG-1A（岛津），冷汞发生器MVU-1A（岛津），CEM微波消解仪（美国），XA-105电子分析天平（METTLER TOLEDO）。硝酸为电子级，盐酸、硫酸、硼氢化钠、氢氧化钠、碘化钾、抗坏血酸、氯化亚锡为分析纯，实验用水为高纯水，砷单元素标准溶液：1000μg/mL（中国计量科学研究院GBW08611 15083），汞单元素标准溶液：100 μg/mL（中国计量科学研究院GBW（E）080124 15103）。金银花150309（来源：亳州，产地：山东）；金银花150701（来源：安国，产地：山东）；金银花150301（来源：玉林，产地：河南）；金银花 150222（来源：河北，产地：山东）；金银花150901（来源：平邑，产地：山东）经锦州市药品检验检测中心鉴定为真品。
2 方法与结果
2.1 样品处理
取样品粗粉0.5 g，精密称定，置聚四氟乙烯消解罐内，加硝酸10 mL，混匀，浸泡过夜，盖好内盖，旋紧外套，置微波消解仪内进行消解。消解完全后，取消解罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸气挥尽，并继续缓缓浓缩至2～3 mL，放冷，用水定容至25 mL。同法制备试剂空白溶液。精密吸取空白溶液和供试品溶液各10 mL，加入25%碘化钾溶液（临用前配制）1 mL，10%抗坏血酸溶液（临用前配制）1 mL，用盐酸（20→100）稀释至刻度，摇匀，密塞，置80 ℃水浴中加热3 min，取出，放冷，测定吸收值，从砷标准曲线上读出砷的含量。精密吸取空白溶液和供试品溶液各5 mL，置冷汞发生器反应瓶中，向反应瓶中加0.5 mol/L硫酸溶液100 mL，10 mL酸性氯化亚锡溶液，测定吸收值，从汞标准曲线上读出汞的含量。
2.2 测定条件
砷检测波长：193.7 nm；汞检测波长：253.7 nm；狭缝0.7 nm；点灯方式：BGC-D；燃烧器高度：19.5 mm。
2.3 标准曲线的绘制
精密量取砷单元素标准溶液（1 000 μg/mL）1 mL，置1 000 mL量瓶中，加2%硝酸稀释至刻度，制成每1 mL含砷1 μg的砷标准贮备液。分别精密量取20 mL置200 mL量瓶中，加2%硝酸稀释至刻度，再分别精密量取0、5、10、20、30、40 mL置100 mL量瓶中，制成每1 mL分别含砷0 ng、5 ng、10 ng、20 ng、30 ng、40 ng的溶液。分别精密量取10 mL置25 mL量瓶中，加入25%碘化钾溶液（临用前配制）1 mL，10%抗坏血酸溶液（临用前配制）1mL，用盐酸（20→100）稀释至刻度，摇匀，密塞，置80 ℃水浴中加热3 min，取出，放冷，测定吸收值，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制砷标准曲线，回归方程为：A=0.014175C-0.019981，线性范围为0～16 ng，r=0.995 8。
精密量取汞单元素标准溶液（100 μg/mL）10 mL，置1 000 mL量瓶中，加2%硝酸稀释至刻度。分别精密量取1 mL置100 mL量瓶中，加2%硝酸稀释至刻度，制成每1 mL含汞10 ng的汞标准贮备液。再分别精密量取0、5、10、15、20、25 mL，置冷汞发生器反应瓶中，向反应瓶中加0.5 mol/L硫酸溶液100 mL，10 mL酸性氯化亚锡溶液，测定吸收值，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制汞标准曲线，回归方程为：A=0.0023246C-0.00089048，线性范围为0～250 ng，r=0.998 5。
2.4 检出限
将空白溶液连续进样11次，计算其标准偏差，并由标准曲线斜率，得出仪器检出限=3标准偏差/灵敏度，结果砷的仪器检出限为0.2 ng；汞的仪器检出限为0.1 ng。
2.5 精密度实验
分别吸取上述40 ng/mL砷标准液和250 ng/mL汞标准液，连续进样6次，测定吸收度，结果RSD分别为0.7%和1.7%，表明精密度良好。
2.6 重复性实验
取批号为150309的金银花样品，按上述样品处理方法平行制备6份样品测定，结果RSD分别为2.7%和1.1%，表明重复性良好。
2.7 加标回收率实验
精密称取批号为150309的金银花样品（含砷0.5 mg/kg）6份，分别精密加入砷标准溶液（20 ng/mL）15 mL，按样品制备方法对样品进行处理，并按以上条件测定，计算砷加标回收率，结果见表1。
精密称取批号为150309的金银花样品（含汞1.6 mg/kg）6份，分别精密加入汞标准溶液（100 ng/mL）8 mL，按样品制备方法对样品进行处理，并按以上条件测定，计算汞加标回收率，结果见表2。
2.8 样品测定
按上述测定方法对5批不同样品进行砷含量测定和汞含量测定，结果分别见表3和表4。
3 讨论
砷（As）元素水溶液在酸性条件下与强还原剂NaBH4反应，生成气态的氢化物，由氩气带入原子吸收分光光度计燃烧头上的石英管内进行原子化，在193.7 nm测量其吸光度。
在常温下，用氯化亚锡还原剂（SnCl2·2H2O）将水样中化合态汞还原为金属汞蒸气，内置载气泵将汞蒸气带入AA的石英流通池中，结合AA使用Hg灯253.7 nm波长做定量测定。
由于汞对环境污染较大，不能直接排放到空气中，需要在测定完成后用空气泵把汞蒸气引入配置0.5%高锰酸钾和5%硫酸的混合液中吸收。
从样品分析结果看出，市面上零售的金银花饮片中含砷、汞量都较高，其中有三批含汞量超出药典规定限度，因此临床、生产企业在采购以及使用这些饮片时一定要注意，同时也建议相关食药监部门对所管辖区内的中药材市场进一步监管规范。
汞的测定可用分光光度法、冷蒸汽原子吸收法、原子荧光法、电化学法、电感耦合等离子体发射光谱法、电感耦合等离子质谱法等。《中国药典》2015版四部重金属及有害元素检查中要求汞的测定采用冷蒸汽吸收法，但该项目下的内容中采用的是氢化物发生装置[5]。该实验中详细地介绍了冷蒸汽吸收法的操作步骤，具有简单、快速和灵敏度高，操作成本低的特点，符合药典规定，可以满足药品检验检测的要求。
[参考文献]
[1] 张金莲，张文.金银花中微量元素分析[J].微量元素与健康研究，2004，21（3）：22-27.
[2] 吕琳琳，罗威巍，张咏梅.ICP-AES法测定金银花、金莲花中多种微量元素[J].安徽农业科学，2008，36（27）：11796-11797.
[3] 中央二套《经济半小时》暗访隆回硫磺金银花[EB/OL].http：//www.longhuiren.net/XinWen/N-4413.aspx.2013- 03-27/2013-06-20.
[4] 叶子申.厦门商报业界揭金银花造假内幕：九成金银花硫磺熏制[EB/OL].http：//www.zyctd.com/info-item-342159 -1-1.html，2011-08-29/2013-06-20.
[5] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（四部）[S].北京：中国医药科技出版社，2015：205.
（收稿日期：2016-05-16）
